Máster Universitario en Biotecnología y Biomedicina
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Examinando Máster Universitario en Biotecnología y Biomedicina por Autor "Begara Morales, Juan C."
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Ítem ANÁLISIS FUNCIONAL DE DIANAS CELULARES DE NITRACIÓN DURANTE LA RESPUESTA DE LA PLANTA AL ESTRÉS POR ARSÉNICO(2021-02-24) Moreno-Sánchez, Antonio J.; Begara Morales, Juan C.; Chaki Abdellaoui, Mounira; Universidad de Jaén. Biología Experimental[ES]Las plantas están sometidas a diferentes situaciones de estrés medioambiental que pueden afectar a su desarrollo y crecimiento óptimos. Este trabajo se ha centrado en estudiar el estrés abiótico por arsénico (As) que es un metaloide presente en suelos y herbicidas nocivo para la planta y por tanto para la salud del consumidor. La toxicidad del As desencadena la producción descontrolada de especies de oxígeno y nitrógeno reactivo que inducen un estrés nitro-oxidativo. Entre estas especies reactivas se encuentra el óxido nítrico y sus especies derivadas que median procesos de modificaciones postraduccionales de proteínas como por ejemplo la nitración de tirosina que modula la función proteica. La planta posee mecanismos de defensa frente a las situaciones de estrés oxidativo como son los sistemas antioxidantes, cuya función está también regulada por el óxido nítrico. En el presente trabajo, se plantea abordar la identificación de dianas nucleares de nitración en situaciones de estrés abiótico por arsénico con objeto de identificar aquellas dianas que pueden mediar la respuesta de la planta frente al estrés generado. Para la puesta de manifiesto de las dianas de nitración nucleares frente al estrés por As se utilizaron cultivos de Arabidopsis thaliana sometidos a diferentes concentraciones de As. Las dianas de nitración se identificarán mediante inmunoprecipitación y espectrometría de masas. Los resultados obtenidos aportarán información sobre la adaptación de los cultivos al estrés por As y sus consecuencias económicas asociadas.Ítem Caracterización de estrés por alta temperatura en plantas de Arabidopsis thaliana(2021-02-24) Cara Ortega, Rubén; Barroso Albarracín, Juan B.; Begara Morales, Juan C.; Universidad de Jaén. Biología Experimental[ES] Las plantas se encuentran sometidas constantemente a cambios ambientales que afectan negativamente a su desarrollo óptimo, induciéndoles una situación de estrés. En el contexto del cambio climático, el estrés causado por las altas temperaturas ha adquirido especial interés. Distintos tipos de estreses abióticos son capaces de inducir la producción de especies de oxígeno reactivo (ROS), que pueden causar alteraciones en el funcionamiento de las biomoléculas del organismo llegando a producir daño celular. Sin embargo, las plantas poseen un amplio abanico de sistemas antioxidantes como estrategia de defensa frente a las ROS, como el enzima catalasa o el ciclo glutation-ascorbato. En este sentido, el equilibrio entre ROS y sistemas antioxidantes es fundamental para el control de la homeostasis redox celular y, por tanto, para la regulación de numerosos procesos biológicos. En este trabajo, cultivos celulares de Arabidopsis thaliana fueron sometidos a unas condiciones de estrés por alta temperatura con objeto de analizar el efecto en la formación de ROS e inducción de estrés oxidativo. Paralelamente, se analizó la respuesta generada en algunos de los enzimas antioxidantes de la planta mediante ensayos espectrofotométricos, SDS-PAGE y Western-Blot. Los cultivos sometidos a alta temperatura manifestaron un aumento en la producción de ROS y marcadores de estrés oxidativo. Además, se produjo una inhibición de los principales sistemas antioxidantes como son catalasa y el ciclo glutation-ascorbato. Sin embargo, no se observó variación en la actividad de los enzimas deshidrogenasas dependientes de NADP. Estos resultados sugieren que el estrés por alta temperatura desencadena un estado de estrés oxidativo producido por la inactivación de los sistemas antioxidantes y la consecuente acumulación de ROS y daño celular producido en la planta.Ítem Identificación de dianas nucleares de nitración durante el estrés por cadmio en Arabidopsis(2021-02-24) Liébana Mimbrera, Pedro; Chaki Abdellaoui, Mounira; Begara Morales, Juan C.; Universidad de Jaén. Biología Experimental[ES]El óxido nítrico (NO) es una molécula señal implicada en la respuesta de la planta frente a diferentes condiciones de estrés biótico y abiótico. El NO y otras especies de nitrógeno reactivo pueden mediar en los procesos de señalización a través de las modificaciones post-traduccionales, tales como la S-nitrosilación y la nitración de proteínas. Estás modificaciones post-traduccionales alteran un amplio rango de parámetros funcionales como la actividad catalítica de la proteína, la localización sub-celular y la estabilidad de las proteínas. Dada la escasez de información respecto a la nitración de proteínas nucleares en plantas, el objetivo principal de este trabajo consiste en identificar las dianas nucleares de nitración en cultivos celulares de Arabidopsis thaliana tratados con cadmio. Para ello, se determinarán los niveles de los marcadores de estrés oxidativo como el peróxido de hidrógeno y malondialdehído mediante espectrofotometría en cultivos celulares tratados con cadmio, la actividad de las principales enzimas antioxidantes, se identificarán las proteínas nucleares por espectrometría de masas, se realizará la inmunoprecipitación de proteínas nucleares empleando un anticuerpo frente a 3-nitrotirosina conjugado con perlas magnéticas y se identificarán las dianas nitradas por espectrometría de masas. Por último, se realizará un análisis de la modulación funcional de las dianas identificadas.