Purificación parcial del compuesto proteico antimicrobiano por Paenibacillus Thiaminolyticus 165 en condiciones in vitro

Abstract

El objetivo de esta investigación fue caracterizar la bacteria Paenibacillus thiaminolyticus 165, determinar su actividad antimicrobiana y purificar parcialmente el compuesto antimicrobiano que produce. Se determinó la actividad frente a bacterias gram positivas y gram negativas mediante la técnica de difusión en agar. Posteriormente mediante cromatografía de intercambio iónico se purificó el compuesto antimicrobiano. Los resultados indicaron que es una bacteria Gram positiva con forma de bastón y generadora de esporas. Forma colonias blancas, rugosas y con bordes rizoides en TSA. La bacteria presentó crecimiento a pH neutro y a temperaturas de30o a 45o C. El péptido antimicrobiano producido es activo frente a Salmonella spp., Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Listeria monocytogenes y Klebsiella spp. Las condiciones óptimas para la mayor producción de péptidos antimicrobianos tienen lugar en medio TSB (pH 7.1) a 30o C durante 27 horas. La técnica de cromatografía de intercambio iónico utilizada no nos permitió una purificación del compuesto antimicrobiano, debido probablemente a su naturaleza protéica o a su conformación estructural.

This research was to characterize the bacterium Paenibacillus thiaminolyticus 165, determine its antimicrobial activity and partially purify the antimicrobial compound that produc. The activity against gram-positive and gram-negative bacteria was determined by the agar diffusion technique. Subsequently, by means of ion exchange chromatography, the antimicrobial compound was purified. Results indicated that is a Gram positive rod shaped bacterium and spore generator. It forms white, rough colonies with rhizoid borders on TSA. The bacteria presented growth at neutral pH and at a temperature of 45o C. The antimicrobial peptide produced is active against Salmonella spp., Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Listeria monocytogenes and Klebsiella spp. The optimal conditions for the highest production of antimicrobial peptides take place in TSB medium (pH 7.1) at 30oC for 27 hours. Chromatography technique used did not allow a purification of the antimicrobial compound, probably due to its proteinic nature or its structural conformation.