Nuevas técnicas de aislamiento cromatínico para el análisis de la expresión génica

Abstract

[ES]La ARN polimerasa II tiene un papel fundamental en la expresión transcribiendo genes codificantes de proteínas y sintetizando ARNs no codificantes. Por ello es objeto de estudio en la comunidad científica, donde podemos encontrar algunos modelos de análisis de la asociación de la ARN polimerasa II al ADN, asumiendo una correlación con la actividad transcripcional. Asimismo, las interacciones de las proteínas con el ADN son fundamentales para la expresión génica y la regulación de la cromatina y se han convertido en una de las principales áreas de enfoque en numerosos grupos de investigación. Gracias a los avances en la espectrometría de masas y las tecnologías asociadas se ha facilitado el estudio de estas interacciones, revelando muchas proteínas de unión al ADN nuevas y modificaciones postraduccionales de las histonas. Empleando como organismo modelo eucariota la levadura Saccharomyces cerevisiae, en este trabajo se van a utilizar técnicas de aislamiento de fracciones enriquecidas de cromatina para el análisis global de proteínas asociadas a la misma mediante western blot, de forma que se consigan mejorar técnicas anteriormente establecidas.[EN]The RNA polymerase II plays a crucial role in gene expression transcribing protein coding genes and genes for non-coding RNAs. It is therefore an object of study in the scientific community, where we can find some models of analysis of the association between RNA polymerase II and DNA, assuming a correlation with transcriptional activity. Moreover, interactions of proteins with DNA are essential for gene expression and regulation of chromatin and have become one of the main areas of focus in many research groups. Thanks to the advances in mass spectrometry and associated technologies, the study of these interactions have been facilitated, revealing many new proteins binding DNA and histone post-translational modifications among others. Employing the yeast Saccharomyces cerevisiae as a model of an eukaryotic organism, in this study we will use techniques to isolate enriched chromatin fractions for global analysis of proteins associated to it by western blot, to improve other stablished techniques.