Regulación de la expresión post-transcripcional del clúster miR-23a-miR-27a-miR-24-2 mediada por RNPs en función de Mef2c

Abstract

[ES] El corazón adulto no puede generar nuevos cardiomiocitos de manera eficiente ya que la capacidad de regeneración del miocardio es muy limitada. La regulación del desarrollo y crecimiento de los cardiomiocitos esta controlado tanto a nivel transcripcional mediante distintos factores de transcripción, como a nivel post-transcripcional, mediante microARNs. Los microARNs son pequeños ARNs no codificados que promueven o inhiben la traducción del ARNm, demostrándose que son importantes en el desarrollo cardiaco. El factor de transcripción MEF2C es capaz de regular transcripcionalmente distintos microARNs a nivel cardiaco. Se ha identificado que MEF2C que regula la expresión del cluster de microRNAs miR-23a-miR27a-miR-24-2 mostrando discrepancia a nivel de los precursores de primiRNA y premiRNAs respecto a los microARNs maduros. Los precursores no varían su expresión mientras que distintos miembros del clusters son selectivamente incrementados o disminuidos. Por ello se ha postulado que MEF2c podria regular nivel post-transcripcional la expresión de estos microARNs maduros, de manera indirecta mediante regulación de la expresión de RNPs. Para ello en primer lugar se analizó si Mef2c modula la expresión de los RNPs ADAR, Ddx5, Ddx17, Hnrnp1, Hnrnp2, Hnrnp3 y Ksrp mediante experimentos de perdida y ganancia de función. Los resultados mostraron que Mef2c no varia la expresión de Hnrnp1, mientras que el silenciamiento de Mef2c cambia la expresión de Hnrnp2a, Hnrnp3 y Ddx5, y la sobre-expresión de Mef2c modula la expresión de Ddx17 y Ksrp. En un segundo conjunto de experimentos se silenció la expresión de Ddx17 y Hnrnp2b1 y se observo que estos RNPs regulaban de forma diferencial la expresión de miR-27a pero no de miR-23a. Estos datos permiten concluir que que Mef2c influye en la regulación de miR-27a de manera post-transcripcional indirecta mediante la modulación de la expresión de determinados RNPs.

[EN] The adult heart has a limited capacity to efficiently regenerate new cardiomyocytes. Regulation of cardiomyocyte differentiation and growth is provided by transcriptional and post-transcriptional regulatory mechanisms, the later mainly mediated by microRNAs. MicroRNAs are small non coding RNAs that promote and/or inhibit mRNA translation, and multiple evidences demonstrate their pivotal role in cardiac development. Mef2c transcription factor can regulate the expression of miR-23a-miR27a-miR-24-2 cluster family members. lmportantly differential regulatory expression is observed between precursor transcripts, pri-miRNA and pre-miRNAs, and mature microRNAs. No differential expression is observed for the precursor transcripts while mature microRNAs display distinct differential expression. Overall these data suggest that Mef2c might post-transcriptional regulation the expresion of the distinct miR-23a-miR27a-miR-24-2 cluster family members, probably indirectly by modulating the expression of distinct RNPs. Therefore, we firstly analyzed if Mef2c modulates the expression of the RNPs such as Adar, Ddx5, Ddx17, Hnrnp1, Hnrnp2, Hnrnp3 and Ksrp. The results demonstrate that Mef2c does not regulate Hnrnp1 expression while Mef2c silencing modulates Hnrnp2a, Hnrnp3 and Ddx5 expression Mef2c overexpression changes Ddx17 and Ksrp expression. Secondly, siRNA mediated silencing of Ddx17 and Hnrnp2b1, respectively distinctly regulate miR-23a-miR27a-miR-24-2 cluster family members; miR-27a display differential expression but miR23a. Overall, these data demonstrate that Mef2c influences the post-transcriptional regulation of miR-27a by indirectly modulating RNPs expression.