Estudio comparativo de técnicas de extracción para la determinación de micotoxinas en alimentos

Abstract

[ES] En el Trabajo Fin de Grado que se presenta se ha comparado la efectividad de diferentes técnicas de extracción para la determinación de la micotoxina Citrinina en arroz blanco. Los métodos de extracción desarrollados han sido: (1) extracción sólido- líquido con metanol: agua (8:2),(2) extracción sólido- líquido con etanol: agua (7:3), (3)extracción sólido- líquido con tolueno: acetato de etilo: ácido fórmico (7:3:1), (4) extracción sólido- líquido con acetato de etilo: ácido fosfórico 0.5M (10:1), (5) QuEChERS y (6) extracción sólido- líquido con ácido fosfórico 0.1M: cloruro de metileno (1:10), seguida de clean-up con columnas de inmunoafinidad Supel Tox OchraBind. En todos los casos se comprobó la existencia o no de efecto matriz, la cual se tuvo en cuenta para la determinación de los porcentajes de extracción. Al tratarse la Citrinina de una micotoxina fluorescente, su detección se ha llevado a cabo mediante la medida de su señal fluorescente (λexcitación=332nm y λemisión=508nm; rendijas 10nm/20nm; voltaje: 700V) en disolución metanólica a pH 1.6. Los porcentajes de extracción obtenidos se encontraban en el rango 64,68-93,96 %. Se ha 2 puesto de manifiesto que la sensibilidad de los métodos de análisis desarrollados es apropiada para la determinación de Citrinina en arroz blanco a los niveles establecidos por la Legislación Europea (2 mg/Kg).

[EN] In the Project here presented the efficiency of different extraction techniques for the determination of Citrinin in white rice is compared. The developed extraction methods have been: (1) solid-liquid extraction with methanol:water (8:2), (2) solid-liquid extraction with ethanol:water (7: 3), (3) solid-liquid extraction toluene:ethyl acetate:formic acid (7:3:1), (4) solid-liquid extraction with ethyl acetate:0.5 M phosphoric acid (10: 1), (5) QuEChERS and (6) solid-liquid extraction 0.1 M phosphoric acid:methylene chloride (1:10), followed by a clean-up with Supel OchraBind Tox immunoaffinity columns. In all cases the existence of matrix effect was checked, which was taken into account for determining the extraction percentages. Since Citrinin is a fluorescence mycotoxin, it was detected by measuring its fluorescent signal (λexcitation=332nm and λemission =508nm; slits 10nm/20nm; voltage: 700V) in methanol solution at pH 1.6. The obtained extraction percentages were in the range 64.68 to 93.96%. It has been demonstrated that the sensitivity of the methods of analysis developed is suitable for determining Citrinin in white rice at the levels established by the European Legislation (2 mg/kg).