Examinando por Autor "Cobo-Huesa, Cristina"
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Ítem Análisis genéticos de la maquinaria de transcripción en la levadura Saccharomyces cerevisiae(Jaén: Universidad de Jaén, 2016-03-14) Cobo-Huesa, Cristina; Navarro-Gómez, Francisco; Martínez-Fernández, Verónica; Universidad de Jaén. Biología Experimental[ES] La transcripción en levaduras, como en el resto de eucariotas, es llevada a cabo por las ARN polimerasas I, II y III y en su biogénesis parecen intervenir unos complejos de prefoldinas. Asociada a estos complejos se encuentra la proteína Bud27 en Saccharomyces cerevisiae, ortóloga a la proteína URI/RMP en humanos. Bud27 también media la interacción de la ARN pol. II con los genes y la elongación de la transcripción. En este trabajo de investigación, se ha utilizado una cepa de S.cerevisiae bud27Δ, con deleción para el gen BUD27, cuya mutación da lugar a un fenotipo de termosensibilidad. Se transformó con una genoteca de S.cerevisiae en plásmido multicopia, para buscar los supresores de dicho fenotipo. Tras la realización de diferentes escrutinios, se obtuvo un total de 93 supresores, con alta eficiencia. La posterior identificación de los genes supresores, permitirá relacionarlos con la proteína Bud27 y su función en la transcripción.Ítem Bud27, una proteína tipo chaperona que participa en la transcripción en coordinación con las tres ARN polimerasas(Jaén: Universidad de Jaén, 2016) Cobo-Huesa, Cristina; Navarro-Gómez, Francisco; Universidad de Jaén. Biología Experimental[ES]La transcripción en eucariotas se lleva a cabo por unas enzimas multiméricas denominadas ARN polimerasas. En la biogénesis de estas intervienen varios factores de ensamblaje, entre los que encontramos los complejos de prefoldina, asociados a la prefoldina-like Bud27 en levaduras. Tanto Bud27, como su ortólogo en humanos, URI, median diversos procesos celulares esenciales. Con este trabajo, se han identificado genes supresores del fenotipo de termosensibilidad de una cepa de Saccharomyces cerevisiae, mutante para el gen de esta prefoldina, bud27Δ. A través de análisis bioinformáticos, se ha elaborado una red de interacción de BUD27 con los genes más probables de ejercer la supresión, para visualizar globalmente la conexión de BUD27 con los procesos en los que dichos genes están implicados. Bud27, además, es la primera proteína demostrada que interacciona físicamente con las tres ARN polimerasas y participa en la biogénesis de las mismas, en un proceso dependiente de Rpb5, subunidad común a las tres ARN polimerasas. Con la utilización de una cepa mutante del dominio amino-terminal de Rpb5 se ha querido profundizar en la conexión entre Bud27 y Rpb5 en el ensamblaje de las ARN polimerasas. Los resultados muestran que en la cepa mutante existen defectos de ensamblaje y acumulación citoplasmática de las ARN polimerasas. Futuros estudios con los diferentes supresores permitirán establecer la conexión entre estos y BUD27, así como determinar de manera más precisa la relación entre Bud27 y Rpb5.