Franco-Jaime, DiegoExpósito-Villén, AlmudenaUniversidad de Jaén. Biología Experimental2018-02-152018-02-152017-07-06http://hdl.handle.net/10953.1/6195[ES] El proepicardio (PE) es una aglomeración de células progenitoras localizadas en el seno venoso, esta estructura transitoria es esencial para el desarrollo cardiaco. Migra y da lugar al epicardio, la capa más externa del corazón, la cual sufre una transición epitelio mesénquima e ingresa en el corazón, suministrando a este de progenitores del tejido conectivo vascular y cardíaco. El epicardio tiene un papel esencial en el desarrollo cardiovascular, tanto en la embriogénesis como en regeneración. Los microRNAs, son secuencias cortas no codificantes de entre 19-22 nucleótidos, estas regulan múltiples procesos biológicos y lo hacen mediante la supresión de traducción o la degradación de la transcripción de genes específicos. Se sabe que la falta de función de ciertos microRNAs está relacionado con el desarrollo anormal de estructuras cardiovasculares como podría ser el epicardio y por ende, en la irrigación vascular y estructuras que deriven del mismo. Se han realizado estudios en nuestro laboratorio demostrando que la administración de ciertos microRNAs al proepicardio in vitro contribuye a la modulación de la expresión génica. En este trabajo los transfectados transitoriamente con miR-100, miR-125, miR-146 y miR-195 el proepicardio de estadio se obtiene HH17, en gota colgante para por un lado, trasplantarlo a la cavidad pericárdica de un embrión HH24 mediante un colorante vital y por otro lado, realizar un análisis de qPCR de distintos genes marcadores. Se ha comprobado que la técnica de manejo de proepicardio, transfección e implantación de nuevo en un embrión de estadio HH24 llega a término correctamente. Por otro lado el análisis de expresión de distintos marcadores de cardiogénesis tale como Wnt5a, Smurf1, Semad3, Foxp1, Fosl2 y RhoV se encuentra disminuidos tras el tratamiento con miR-100 mientras que la administración de miR-195, incrementa los marcadores de cardiogénesis. Estos datos sugieren un papel funcional esencial de estos microRNAs en el proceso de diferenciación celular del proepicardio embrionario, dirigiendo su destino celular.[EN] The Proepicardium (PE) is a cluster of progenitor cells located in the venous pole. This transitory structure is essential to the heart development. The PE undergoes a migration and proliferation process forming the Epicardium, the heart most outer layer, through the process known as Epithelial to Mesenchymal Transition (EMT), giving eventually connective, vascular and cardiac progenitor cells. The Epicardium has a fundamental role in the cardiovascular development, either embriogenesis as well as in regeneration processes. microRNAs, are 19 to 22 nucleotides non-coding secuences that regulate biological processes through the translation process supression or transcript degradation for specific target genes.It is already known, that malfunction in certain microRNA is directly related with malformation of some cardiovascular structures such as the Epicardium hence vascular irrigation and some others Epicardium derived structures. Our team has conducted research on in vivo experiments that demonstrate that some microRNA contribute to the modulation of gene expression. In this report is described how we have conducted a transitory transfection with the designated microRNAs miR-100, miR125, miR-146 and miR-195. The PE are collected in stage HH17 and cultured in plates by hanging drop technique. After that, we set those PE in the pericardial cavity of a HH24 stage embryo, using a colorant stain and reveal the PE. We use qRT-PCR techniques for marker genes analysis such as Wnt5, Smurf1, Semad3, Foxp1, Fosl2 and RhoV. The qRT-PCR results have proved that these genes are supressed when the PE are transfected with miR-100, while they are increased when transfected with miR-195. These results suggest the microRNA functional role that seems quite important in the PE differentiation process, also conducting the fate of the differentiated cells.spainfo:eu-repo/semantics/restrictedAccessBiomedicina24072415Biología celularCell biologyBiología molecularMolecular biologyinfo:eu-repo/semantics/masterThesis